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自噬

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自噬是细胞利用溶酶体降解途径进行自我吞食的过程,是细胞在营养不足等压力情况下维持生存的主要代谢途径。自噬主要分为三类,即巨自噬(Macroautophagy)、微自噬(Microautophagy)、分子伴侣介导的自噬(Chaperone-mediated autophagy)。自噬在肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病等多种疾病中发挥重要作用。

自噬发生的过程如下:

图一 自噬发生过程自噬产品介绍:

1.自噬筛选系统:

GFP-LC3 WT/MT

GFP-LC3-RFP-LC3 MT

Luciferase LC3 WT/Luciferase LC3 MT

图二 自噬筛选系统

1.自噬检测系统:

单荧光LC3病毒

pLenti-CMV-EGFP-LC3-PGK-Puro

pLenti-Ubc-EGFP-3FLAG-LC3

pLenti-EF1a-GFP-LC3-PGK-Puro

双荧光LC3病毒

AdV-mCherry-GFP-LC3:高效感染

LV-mCherry-GFP-LC3:稳定表达

AAV-mCherry-GFP-LC3:在体检测Western Blot检测

LC3 I/II、p62:提供LC3、p62抗体检测

图三 自噬检测系统

 

2.自噬基因过表达/干扰慢病毒:

干扰慢病毒、3个靶点/基因、干扰效率70%以上

过表达慢病毒、真核表达载体ORF克隆、对应检测抗体图四 自噬基因操作


 

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