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细胞实验

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CCK8/EdU细胞增殖检测

服务介绍:

CCK-8是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8 [化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],是一种类似于MTT的化合物,它在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下,被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物(formazan)。颜色的深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比。
EdU(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可直接并准确地检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复、病毒繁殖等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及各种药物的细胞增殖及活力筛选实验。

实验结果展示:

 CCK-8实验流程:

1. 接种细胞悬液100μl于96孔板,预先置于37℃,5% CO2饱和湿度培养箱内培养;

2. 每孔内加入10μl的CCK-8试剂;

3. 培养板放培养箱内孵育1-4小时;

4. 酶标仪测定450nm波长度吸光值。

EdU实验流程:

1. 细胞培养:接种细胞悬液于96孔板中,培养至正常生长阶段

2. 药物处理:根据实验需要进行各种药物处理

3. EdU标记:用细胞培养基按1000:1的比例稀释EdU溶液 (试剂A),制备适量50μM EdU培养基;

4. 细胞固定

5. Apollo染色

6. 图像获取及分析


 

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