膜片钳技术(patch clamp recording technique)。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的或多个的离子通道分子活动的技术。它和基因克隆技术(gene cloning)并架齐驱,给生命科学研究带来了巨大的前进动力。
1. 微电极的制备
2. 细胞标本的制备
3. 高阻封接的的形成
4. 离子单通道电流的记录或全细胞记录
1. 贴壁细胞:用胰酶将细胞消化下来,或用细胞刮将细胞刮下来,将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟,弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
2. 悬浮细胞:将培养液1000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
3. 细胞上清:3000转/分,离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。